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3分钟教你如何选购合适的梯度PCR仪
发布时间:2020-04-27   点击次数:583次
   梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,它每个孔的温度可以在范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA片段其适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样可节省试验时间、提高实验效率,又节约实验成本。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。

  PCR技术是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,目前市场上常见的有:普通PCR仪、梯度PCR仪、原位PCR仪、荧光定量PCR仪(qPCR)以及数字PCR仪(dPCR)等。而使用多是梯度PCR仪和荧光定量PCR仪,生产PCR仪厂家也是不胜枚举。
 

  小编将就如何选购一台合适的梯度PCR仪作以下介绍,供大家参考。

  精准的温度控制系统

  对PCR仪来说,温度控制指标主要是指温度的准确性、均一性、以及升降温速度。

  温度的准确性:是指样品孔温度与设定温度的一致性,它直接关系到实验的成败。由于PCR是一个几何级数扩增的过程,不论是变性、退火还是延伸都需要准确控制温度,对退火温度而言温控显的尤为重要,有时1°甚0.5°的差异也能决定实验的成功与失败,所谓差之毫厘,谬之千里。因而对PCR扩增仪而言温度控制就意味着质量。

  温度的均一性:是指样品孔间的温度差异,它关系到在不同样品孔进行反应结果的一致性。有用户发现用同样的样品,同样的PCR反应程序,后的结果竟然差异非常明显,或许就是因为不同位置的温度不均匀所致。同时位置边缘效应对PCR实验可重复性影响非常明显。

  升降温速率:更快的升降温速度,可以缩短反应进行的时间,而且缩短了可能的非特异性结合、反应的时间,能提高PCR反应的特异性。2.2 仪器的功能性和人性化设计,越友好的操作界面、完善的功能以及人性化的设计更能吸引用户。(热盖、样品座、软件)

  热盖:现在的PCR仪一般均配备热盖,热盖温度设为105℃,使样品管顶部的温度达到105℃左右,蒸发的反应液就不会产生凝集在管盖上而改变反应体积,这样用户就无需再向反应管内加石蜡油,直接减少后继反应的麻烦。

  样品座:PCR反应多在0.2或者0.5的管子中进行,多数PCR仪也配备了不同的可更换样品槽适配不同的样品管。

  软件:新的PCR仪都比较注重程序编写的简易性。大屏幕,显示实时信息,倒计时,记忆存储多个程序、自动断电保护等都有助于实验室中的复杂环境使用。

  随着生物技术的发展,PCR仪已经发展为实验室通用仪器,因此生产厂家也是如雨后春笋般层出不穷,光是比较参数,就够累了。况且PCR仪还是实验室中的老黄牛,几乎24小时运转,买台可靠的仪器尤为重要。

  建议在选购PCR仪时,除温度、功能、人性化设计外,还需要注意价格、使用寿命、售后服务、机器噪音、品牌的度等。

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